在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污...

问题详情：

在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物 ）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明）．

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行　       　处理．

（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基且               ．若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装　   　（填“前”或“后”）进行．对培养基进行灭菌，常采用的方法是　            　．

（3）培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是　    　或有氧条件抑制了这些细菌的生长．

（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是　   　，有透明带菌落利用的氮源主要是　       　，据此可筛选出目的菌．

（5）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用                　法．

①测定该菌数时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正确可信的是　   　，理由是　                                              　．

A．一个平板，统计的菌落数是230  B．两个平板，统计的菌落数是220和260，取平均值240

C．三个平板，统计的菌落数分别是210、50和520，取平均值260

D．四个平板，统计的菌落数分别是210、300、240和250，取平均值250

②一同学在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每毫升样品中的菌落数是　      个（涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL）．

③用这种方法测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量   　，因为　                       　．

【回答】

解：（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．

（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：固体培养基且以除草剂作唯一氮源．若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装前进行．对培养基进行灭菌常采用高压蒸汽灭菌法．

（3）在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的细菌（除具有固氮能力的细菌外）是不能生长的．

（4）根据题中信息“含除草剂的培养基不透明”，则可知无透明带菌落利用的氮源并不是除草剂，而是来自空气中的氮气，有透明带菌落利用的氮源为除草剂．

（5）接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法还可用于对微生物进行计数．

①在设计实验时，一定要涂布至少三个平板，才能增强实验的说服力与准确*，而且一般选择菌落数在30～300的平板进行计数．

②在稀释倍数为105的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL，因此每毫升样品中的菌落数是234÷0.1×105=2.34×108．

③涂布时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，这样使测定的大肠杆菌菌落数比实际活菌数量少．

故*为：

（1）稀释

（2）以除草剂作唯一氮源　前　高压蒸汽灭菌

（3）培养基中缺少这些细菌可利用的氮源

（4）氮气　该除草剂

（5）稀释涂布平板

①D　在设计实验时，一定要涂布至少三个平板，才能增强实验的说服力与准确*；一般选择菌落数在30～300的平板进行计数　

②2.34×108　

③少　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落

知识点：微生物的利用

题型：填空题