（2013四川卷）10．（12分）由於酵母菌直接利用澱粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-澱粉酶基因轉入酵母...

問題詳情：

（2013四川卷）10．（12分）由於酵母菌直接利用澱粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-澱粉酶基因轉入酵母菌中經篩選得到了可高效利用澱粉的工程酵母菌菌種（過程如圖*所示）。

（1）圖*中，過程①需要的酶有_____________。為達到篩選目的，平板內的固體培養基應以____________作為唯一碳源。②、③過程需要重複幾次，目的是______________。

（2）某同學嘗試過程③的*作，其中一個平板經培養後的菌落分佈如圖乙所示。該同學的接種方法是_____________________；推測該同學接種時可能的*作失誤是______________。

（3）以澱粉為原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發酵，接種________菌的發酵罐需要先排氣，其原因是__________________________。

（4）用凝膠*譜法分離α一澱粉酶時，在*譜柱中移動速度較慢的蛋白質，相對分子質量較________。

【回答】

【*】（1）限制*核*內切酶、DNA連接酶       澱粉      進一步篩選純化獲得分解澱粉能力強的酵母菌   

（2）稀釋塗布平板法     塗布不均勻  

（3）工程酵母      工程菌分解澱粉產生葡萄糖的能力強，導致酒精發酵產生CO2的速率更快    

（4）小

【解析】本題考查選修本中相關知識，包括有基因工程、微生物的培養和發酵、蛋白質的提取和分離等。

（1）①步驟為將目的基因與運載體連接，需要先用同一種限制*核*內切酶分別切割質體和目的基因，露出相同的黏*末端，然後再用DNA連接酶連接為重組質體；而在以澱粉為唯一碳源的培養基中，其他微生物難以利用澱粉而被抑制，從而篩選高效利用澱粉的工程酵母菌；重複篩選多次可以提高目的菌的純度。

（2）圖中平板培養後的結果，形成了多個菌落，因此為稀釋塗布平板法，但是菌落分佈不均勻，集中分佈在一定區域，説明塗布不均勻。

（3）由於工程酵母菌能夠更高效的利用澱粉，因此在以澱粉為原料的培養條件下，可以更快的進行增殖和發酵，酒精發酵產生的二氧化碳較多，所以需要先排氣。

（4）凝膠*譜法分離的原理是相對分子質量較大的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部，只能分佈在顆粒之間，通過的路程較短，移動速度較快；相對分子質量較小的蛋白質分子比較容易進入凝膠內的通道，通過的路程較長，移動速度較慢。因此，移動速度較慢的蛋白質，相對分子質量較小。

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題