Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治...

问题详情：

Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如图（图中数字序号表示的是相关过程）。请回答下列有关问题：

（1）过程②利用的技术是______________，过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是____________。

（2）过程③中获取的目的基因是_______________，可以根据该基因的___________________设计引物，利用PCR技术扩增目的基因片段。按此方法和图示技术流程，完成基Rag2基因缺失小鼠的基因治疗涉及的酶有____________和耐高温的DNA聚合酶(Taq酶)等。

（3）图中造血干细胞中的遗传物质至少有___________个来源。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用____________进行杂交实验。图中所述克隆技术属于___________克隆。

【回答】

早期胚胎培养    ES细胞    (正常的）Rag2基因    脱氧核苷*序列(或碱基对序列或遗传信息）    限制*核*内切酶、DNA连接酶和胰蛋白酶    三    抗Rag2蛋白的抗体    治疗*(或体细胞核移植等）   

【解析】

分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解，其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。

（1）结合前面的分析可知，过程②利用的技术是早期胚胎培养，过程③中涉及到了基因工程技术，其中作为受体细胞的是ES细胞。

（2）图示利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，可推知过程③中获取的目的基因是（正常的）Rag2基因。步骤③中，在构建含有Rag2基因的表达载体时，可以根据Rag2基因的脱氧核苷*序列设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段。分离、培养ES细胞过程中需要用胰蛋白酶分散细胞。PCR技术扩增过程中用耐高温的DNA聚合酶（Taq酶），基因导入过程中需要用限制*酶核*内切酶和DNA连接酶。

（3）图中造血干细胞中的遗传物质至少有3个来源：上皮细胞的核基因、卵母细胞的质基因和Rag2基因。为检测Rag2基因的表达情况，可采用抗原-抗体杂交法，即提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质（抗原），用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验。根据图形分析可知：基因导入在体外进行的，因此，该治疗方式属于体外基因治疗，图中所述克隆技术也属于治疗*克隆。

【点睛】本题以基因治疗的流程图为载体，关键要能识记细胞核移植和胚胎工程的相关知识；熟悉基因工程中PCR技术、目的基因的获取、导入、检测和鉴定等。尤其应注意造血干细胞中遗传物质（基因）的来源。

知识点：基因工程

题型：实验题