GDNF是一種神經營養因子。對損傷的神經細胞具有營養和保護作用。研究人員構建了含GDNF基因的表達載體(如圖1...
問題詳情:
GDNF是一種神經營養因子。對損傷的神經細胞具有營養和保護作用。研究人員構建了含GDNF基因的表達載體(如圖1所示),並導入到大鼠神經幹細胞中,用於幹細胞基因治療的研究。請回答:
(1)在分離和培養大鼠神經幹細胞的過程中,使用胰蛋白酶的目的是 。
(2)構建含GDNF基因的表達載體時,需選擇圖1中的 限制酶進行酶切。
(3)經酶切後的載體和GDNF基因進行連接,連接產物經篩選得到的載體主要有三種:單個載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接(如圖1所示)。爲鑑定這3種連接方式,選擇HpaI酶和BamHI酶對篩選的載體進行雙酶切,並對酶切後的DNA片段進行電泳分析,結果如圖2所示。圖中第 泳道顯示所鑑定的載體是正向連接的。
(4)將正向連接的表達載體導入神經幹細胞後,爲了檢測GDNF基因是否成功表達,可用相應的
與提取的蛋白質雜交。當培養的神經幹細胞達到一定的密度時,需進行 培養以得到更多數量的細胞,用於神經幹細胞移植治療實驗。
【回答】
(1)使細胞分散開
(2)XhoI
(3)2
(4)抗體 傳代
【解析】選修本的理論測試重點在相關工程的理論基礎和*作流程,一般題目要求難度不大,以記憶爲主,記憶以*作流程爲主幹輔以理論基礎。
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題