在含有X-gal和IPTG物質的培養基上,大腸桿菌質粒上的lacZ基因如表達出產物β-半乳糖苷酶,則能使菌落呈...
問題詳情:
在含有X-gal和IPTG物質的培養基上,大腸桿菌質粒上的lacZ基因如表達出產物β-半乳糖苷酶,則能使菌落呈現藍*,否則菌落呈現白*,基因工程中常利用該原理從匯入質粒的受體細胞中篩選出真正匯入重組質粒的細胞。某基因工程*作部分過程如下,請據圖回答:
(1)限制酶EcoRI的識別序列和酶切位點是-G↓AATTC-,SmaI的識別序列和酶切位點是-CCC↓GGG-,圖中目的基因被切割下來和質粒連線之前,需在目的基因的右側連線相應的末端,連線的末端序列是 。限制酶EcoRI在質粒上的酶切位點在lacZ基因中,故該基因工程*作中,lacZ基因的作用為 基因。
(2)獲取目的基因後,常利用 技術在體外將其大量擴增,此過程需要一種特殊的酶叫 。
(3)轉化過程中,大腸桿菌應先用 處理,使其成為
細胞。
(4)含有目的基因的菌落的顏*為__________,原因是 。
【回答】
(1)-TTAA 標記(或報告)
(2)PCR(多聚酶鏈式反應) Taq酶(或“Taq DNA聚合酶”“耐高溫的DNA聚合酶”)
(3)Ca2+(或CaCl2溶液) 感受態
(4)白* lacZ標記基因區*入外源基因後被破壞,不能表達出β-半乳糖苷酶,故菌落為白*
知識點:生物技術的安全*和倫理問題
題型:填空題