前不久，一種名為耳念珠菌的多重耐*真菌（超級真菌）在美國多地流行。請回答下列有關問題：（1）實驗室在培養皿中培...
問題詳情：
前不久，一種名為耳念珠菌的多重耐*真菌（超級真菌）在美國多地流行。請回答下列有關問題：
（1）實驗室在培養皿中培養的超級真菌如圖所示，其採用的培養方法最可能為____________________，要從超級真菌與其他細菌混雜的一個菌群中將超級真菌純化，應當使用的培養基除碳源、氮源、水、無機鹽、維生素以及必需的生長因子外，還需要新增__________製成選擇培養基。
（2）超級真菌的基因（目的基因）在大腸桿菌細胞內表達時，表達出的蛋白質可能會被降解。為防止蛋白質被降解，在實驗中應選用____________________的大腸桿菌作為受體細胞，在蛋白質純化的過程中應新增__________的抑制劑。
（3）固定化技術包括包埋法、化學結合法和物理吸附法。假定經過基因工程處理後的超級真菌具有催化某種反應的生物活*，現欲長期使用並儲存該超級真菌（突變體X），那麼，宜使用的固定化技術是__________，不選用另外兩種的理由是____________________。
（4）實驗全部結束後需要對所有儀器以及廢液進行後續處理。處理玻璃、金屬儀器宜用乾熱滅菌法，此過程的溫度為______；處理廢液最適宜放置於高壓蒸汽滅菌鍋中，若未將鍋內冷空氣排盡，則會出現______________________________的後果。
【回答】
平板劃線法 抗生素 不含蛋白酶基因 蛋白酶 包埋法 包埋法適用於固定化細胞，化學結合法與物理吸附法更適合固定酶 160~170℃ 鍋內溫度達不到預設溫度而影響滅菌
【解析】
微生物接種的方法中最常用的是平板劃線法和稀釋塗布平板法，前者是指通過接種環在瓊脂固體培養基表面連續劃線的*作，將聚集的菌種，逐步稀釋分散到培養基的表面，後者是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然後將不同稀釋度的菌液分別塗布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。
滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內外一切微生物的細胞、芽孢和孢子的過程，常用的方法有灼燒滅菌、乾熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。
固定化酶、固定化細胞的比較：
固定化酶 | 固定化細胞 | |
酶的種類 | 一種 | 一系列酶 |
製作方法 | 物理吸附法、化學結合法 | 包埋法 |
是否需要營養物質 | 否 | 是 |
缺點 | 不利於催化一系列的酶促反應 | 反應物不宜與酶接近，尤其是大分子物質，反應效率下降 |
優點 | ①既能與反應物接觸，又能與產物分離②可以反覆利用 | 成本低，*作容易 |
【詳解】
（1）培養方法包括平板劃線法和稀釋塗布平板法，稀釋塗布平板法會使菌落在平板上均勻分佈，平板劃線法有多次劃線，每次劃線都來自於上一次劃線的末端從而實現稀釋，由圖可知，超級真菌通過平板劃線法接種在固定培養基上；超級真菌為多重耐*，故在純化培養時，需新增抗生素，只有超級真菌能在添加了抗生素的選擇培養基上生長。
（2）蛋白質會被蛋白酶降解，為防止蛋白質被降解，在實驗中應選用不含蛋白酶基因的大腸桿菌作為受體細胞；在蛋白質純化的過程中應新增蛋白酶的抑制劑來防止蛋白質的降解。
（3）固定化技術包括包埋法、化學結合法和物理吸附法，現欲長期使用並儲存該超級真菌（突變體X），宜使用的固定化技術是包埋法，包埋法更適合固定細胞，而化學結合法與物理吸附法更適合固定酶，真菌屬於細胞，故使用包埋法。
（4）處理玻璃、金屬儀器宜用乾熱滅菌法，乾熱滅菌法常用的溫度為160~170℃；處理廢液最適宜放置於高壓蒸汽滅菌鍋中，若未將鍋內冷空氣排盡，則會出現鍋內溫度達不到預設溫度而影響滅菌的後果。
【點睛】
本題主要考查微生物的培養、固定化技術和滅菌技術等知識點，要求學生掌握固定化細胞和固定化酶所用的方法，滅菌技術過程中的*作等，屬於識記理解水平的考查。
知識點：微生物的培養與應用
題型：綜合題
