下圖*表示某細菌的質體中相關限制酶的切割位點，圖乙表示目的基因所在的DNA中相關限制酶的切割位點。請分析並回答...

問題詳情：

下圖*表示某細菌的質體中相關限制酶的切割位點，圖乙表示目的基因所在的DNA中相關限制酶的切割位點。請分析並回答下列問題：

⑴用Sma l限制酶處理圖*所示的質體會得到________個DNA片段，用Alu Ⅰ處理圖乙所示的外源DNA會增加________個遊離的**基團。

⑵為了避免目的基因和質體在酶切後產生的片段發生自身環化或任意連接，以及便於篩選需要，在實際*作中，一般應選用_____________(填限制酶名稱)同時酶切質體和含目的基因的外源DNA。再用DNA連接酶處理。如果是用PCR技術擴增目的基因，設計引物是關鍵，但在擴增時退火温度一般為55℃一60℃，對於(A+T)％>50％，一般用55℃；(A+T)％≤50％時一般用60℃，原因是________________________________。

⑶為了篩選獲得含有重組質體的大腸桿菌，實驗人員首先將經轉化處理過的大腸桿菌接種在含_____________(抗生素)的培養基中，然後用影印法將該培養基上的菌落按原來的方向印在含_______________(抗生素)培養基上，以篩選獲得含重組質體的細菌。在含四環素培養基中能生長繁殖，而在含*黴素培養基中不能生長繁殖的是導人了_______________的大腸桿菌。

⑷經檢測：在上述導入了重組質體的大腸桿菌菌株中，目的基因正常轉錄形成了mRNA，但其所控制合成的蛋白質卻並不具有生物活*，最可能的原因是________________________                    。

【回答】

 (1) 2   2        (2)PstI和HindⅢ     G與C(之間是三個*鍵)

比例越高越穩定

(3)四環素    *黴素     重組質體(或目的基因)

(4)大腸桿菌細胞內缺乏內質網與高爾基體(或大腸桿菌缺乏生物膜系統)，不能對多肽鏈進行加工（摺疊、組裝與修飾）

知識點：生物技術的安全*和倫理問題

題型：填空題