生长激素制剂是治疗侏儒症的特效。利用基因工程让大肠杆菌合类的生长激素，部分流程如图所示（注：Ampr为氨...

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生长激素制剂是治疗侏儒症的特效*。利用基因工程让大肠杆菌合*类的生长激素，部分流程如图所示（注：Ampr为氨苄青霉素抗*基因，Tetr为四环素抗*基因，Ori是复制原点；EcoRⅠ、BglⅡ、ClaⅠ表示限制酶）。回答下列问题。

（1）EcoRⅠ识别的碱基序列是GAATTC，该序列中有____________个嘌呤。切割图中的目的基因时不能选择EcoRⅠ，理由是____________。

（2）将重组质粒导入大肠杆菌时，常选用____________处理大肠杆菌，使其成为感受态细胞。该状态的细胞具有____________的特*。

（3）利用标记基因筛选含重组质粒的大肠杆菌时，所用培养基中需添加____________（填“氨苄青霉素”或“四环素”），理由是____________。该基因工程所用的大肠杆菌细胞内本身不能携带____________基因，否则筛选出的大肠杆菌细胞内不一定有目的基因。

【回答】

6 该酶识别的序列在目的基因中间，会破坏目的基因 Ca2+ 易从外界环境吸收DNA 氨苄青霉素重组质粒中有氨苄青霉素抗*基因，而四环素抗*基因被破坏氨苄青霉素抗*

【分析】

基因工程*作的工具是限制*内切酶、DNA连接酶和运载体；基因工程*作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达。目的基因的检测有多种手段，如①DNA分子杂交技术；②分子杂交技术；③抗原-抗体杂交技术。2、标记基因结构完整，则能在对应培养基中生长。

【详解】

（1EcoRⅠ识别的碱基序列应为含有6个碱基对的双链DNA片段，根据碱基互补配对原则，其*有6个嘌呤；图中生长激素基因是目的基因，而该基因中有EcoRⅠ识别的序列，使用该酶切割会破坏目的基因，故不能选择EcoRⅠ切割目的基因。

（2）大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：用Ca2+处理大肠杆菌细胞，改变细胞膜的通透*，使之成为感受态细胞；该状态的细胞易从外界环境吸收DNA。

（3）利用标记基因筛选含重组质粒的大肠杆菌时，四环素抗*基因被破坏，而重组质粒中有氨苄青霉素抗*基因，因此，培养基中应添加的抗生素是氨苄青霉素；故为达到筛选目的，该基因工程所用的大肠杆菌细胞内本身不能携带氨苄青霉素基因。

【点睛】

本题考查基因工程的相关知识，解答本题的关键是掌握基因工程的原理、*作工具及*作步骤，能正确分析题图，同时能结合图中信息准确答题。

知识点：基因工程

题型：综合题

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