获取目的基因是实施基因工程的第一步，获取的方式也多种多样。从基因文库中直接获取和利用PCR技术扩增就是两种常用...

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获取目的基因是实施基因工程的第一步，获取的方式也多种多样。从基因文库中直接获取和利用PCR技术扩增就是两种常用的方式，回答下列问题：

（1）基因文库中cDNA文库与基因组文库相比，前者较小，原因是_________。

（2）PCR过程所依据的原理是_______________，扩增过程需要加入_______________酶。

（3）构建基因表达载体时，目的基因的首端必须含有________，它的作用是___________。

（4）将目的基因导入到植物细胞中有多种方法，请写出两种_________________________。

【回答】

    (1). cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的，在这个时期并不是每个基因都进行转录，而基因组文库包含该生物所有的基因    (2). DNA双链复制    (3). 耐高温的DNA聚合（Taq酶）    (4). 启动子    (5). 作为RNA聚合酶识别并结合的部位，启动转录过程    (6). 农杆菌转化法、花粉管通道法

【解析】试题分析：基因组文库是指包含某种生物所含有的全部基因组成的基因文库，且含有的基因结构完整，不仅含有能编码蛋白质的编码序列，还含有非编码序列；cDNA文库仅仅是某生物体细胞内提取的部分mRNA为模板，经反转录产生cDNA,其所包含的基因不仅数量少，而且每个基因的结构不完整，即基因中没有启动子、内含子等结构。获取目的基因不仅可以从基因文库中获取，也可以通过PCR技术进行扩增获取，部分短小且碱基序列已知的目的基因还可以通过化学方法合成。基因工程中核心步骤是构建基因表达载体。将目的基因导入植物受体细胞常用农杆菌转化法、花粉管通道法；导入动物受体细胞常用显微注*法；导入微生物细胞常用感受态细胞法。

（1）cDNA文库是通过某种生物发育的某个时期mRNA反转录产生的，而这个时期并不是每个基因都进行转录，基因组文库包含该种生物所有的基因，所以cDNA文库比基因组文库小。

（2）PCR的原理是DNA双链复制；扩增过程是在较高温度下进行的，因此需要加入耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）。

（3）基因表达载体的组成部分中，首端为启动子，启动子的作用是RNA聚合酶识别并结合的部位，启动转录过程。

（4）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，除此之外还有基因*法、花粉管通道法等。

知识点：生物技术的安全*和伦理问题

题型：填空题