图1为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗*基因,Tc为四环素抗*基因,lacZ为蓝...
问题详情:
图1为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图.图中Ap为氨苄青霉素抗*基因,Tc为四环素抗*基因,lacZ为蓝*显*基因,EcoRⅠ(0.7Kb)、PvuⅠ(0.8Kb)等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离,1Kb=1000个碱基对长度.请据图回答:
(1)质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是 、 .
(2)如果是两两重组,可能有 种长度的重组结果.
(3)基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤.现运用 酶切质粒,完全酶切后进行电泳观察,若出现长度为1.1kb和 kb,或者 kb
和 kb的片段,则可以判断该质粒已与目的基因重组成功(重组质粒上目的基因的*入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计).
(4)将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是 (多选).
A.质粒 B.动物病毒 C.噬菌体 D.植物病毒
(5)为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在培养基上培养,得到如图示2的菌落.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含 的培养基上培养,得到如图3的结果(空圈表示与图2对照无菌落的位置),挑选目的菌的位置为 .
【回答】
解:(1)由图可知,质粒A中缺少标记基因,质粒C中的复制原点被酶切割,所以A、C不能作为运载体.
(2)用DNA连接酶连接时,可能出现质粒环化、目的基因环化、形成重组质粒,有3种长度的结果.
(3)根据题意,质粒长度为2.7kb,目的基因长度为4.0kb,所以重组质粒长度为6.7kb,出现长度为1.1kb,则另一个长度为5.6kb,若目的基因重组时倒置,可形成3.1kb和3.6kb的片段.
(4)基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒,故导入大肠杆菌的载体可以是质粒和噬菌体.
(5)为了筛选出成功导入重组质粒的大肠杆菌,首先将大肠杆菌在培养基上培养,得到如图乙的1的菌落说明质粒已经导入.再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图乙的2的结果,无菌落的位置表示不抗氨苄青霉素,说明为重组质粒,故挑选目的菌的位置为图1培养基中对应图2中消失的菌落.
故*为:
(1)缺少标记基因 复制原点被限制酶切割
(2)3
(3)EcoRⅠ5.6 3.1 3.6
(4)A C
(5)氨苄青霉素 图1培养基中对应图2中消失的菌落
知识点:生物技术的安全*和伦理问题
题型:填空题