Anti基因是小型猪器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。科学家利用...

问题详情：

Anti基因是小型猪器官表面抗原基因，人工合成的reAnti基因的模板链与Anti基因的模板链互补。科学家利用合成的reAnti基因培育出转基因克隆猪，用于解决人类器官移植时免疫排斥。

(l)利用PCR技术对reAnti基因进行扩增，其原理是 ___，在构建基因表达载体时，用两种不同的限制酶切割reAnti基因和运载体DNA来获得不同的黏*末端，原因是____。

(2)猪胎儿成纤维细胞培养过程中，需要用 ___酶将组织分散成细胞悬液。培育转基因猪时，应使用 ___技术将含有reAnti基因的表达载体导入猪成纤维细胞。再将该转基因猪的细胞核注入____时期的卵母细胞中，构建重组胚胎。

(3)胚胎培养液中除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两*、两素”以及动物血清，其中的“两*”是指____。

(4)用 ___技术检测出转基因克隆猪的细胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是____。

【回答】

DNA双链复制    防止目的基因和运载体DNA自身环化和反向连接（使目的基因定向连接到运载体上）    胰蛋白酶（胶原蛋白酶）    显微注*    减数第二次*中期    氨基*和核苷*    DNA分子杂交技术    reAnti基因抑制了Anti基因的翻译过程，不能合成相应的抗原（reAnti基因转录出的mRNA与Anti基因转录出的mRNA形成了双链，不能翻译合成相应的抗原）   

【分析】

本题是技术是要解决用猪的器官代*体器官进行移植时出现的免疫排异反应。利用合成的reAnti基因培育出转基因克隆猪，用于解决人类器官移植时免疫排斥的原理是：由于以reAnti基因模板链合成的mRNA能与Anti基因的mRNA互补配对，这样在它们互补配对后，会导致Anti基因的mRNA不能进行翻译，因此转基因克隆猪不含有猪抗原。

【详解】

（l）利用PCR技术对reAnti基因进行扩增，其原理类似于DNA的天然复制过程，DNA聚合酶以单链DNA为模板，通过一个或两个人工合成的寡核苷*引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合，形成部分双链。在构建基因表达载体时，用两种不同的限制酶切割reAnti基因和运载体DNA来获得不同的黏*末端，是为了防止目的基因和运载体DNA自身环化和反向连接（使目的基因定向连接到运载体上）。

（2）动物组织的细胞之间相连的物质的化学本质是蛋白质，所以用胰蛋白酶或胶原蛋白酶对动物组织进行处理，使其水解成小分子物质，从而使动物组织分散成细胞悬液。

基因工程中常用的受体细胞有大肠杆菌，枯草杆菌，土壤农杆菌，酵母菌和动植物细胞等。其中，对于细菌或植物细胞，常用质粒作为载体将目的基因导入感受态细胞内；动物细胞则用显微注*的方法，将含有reAnti基因的表达载体导入猪成纤维细胞。再将该转基因猪的细胞核注入减数第二次*中期的卵母细胞中，构建重组胚胎。

（3）胚胎培养液中除了一些无机盐和有机盐外，还需要添加“两*、两素”以及动物血清，其中的“两*”是指氨基*和核苷*，两素指维生素和激素。

（4）用DNA分子杂交技术技术检测出转基因克隆猪的细胞核DNA中含有reAnti基因，但器官表面不含有抗原，原因是reAnti基因抑制了Anti基因的翻译过程，不能合成相应的抗原（reAnti基因转录出的mRNA与Anti基因转录出的mRNA形成了双链，不能翻译合成相应的抗原）。

【点睛】

本题涉及的现代生物技术有基因工程和胚胎工程，包括目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达、动物体细胞核移植技术、早期胚胎培养技术，胚胎移植技术，将科学的最新进展和教材联系起来，考查了考生运用课本知识解决实际问题的能力。

知识点：基因工程

题型：填空题